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-<WRAP hide>====== Préparation de la gélose ======</WRAP>+~~META:title=Préparation de la gélose~~
 ====== Présentation ====== ====== Présentation ======
 La gélose est un mélange de nutriments et d'agar-agar, un gélifiant végétal d'apparence semblable à la gélatine. La culture sur gélose permet de purifier une espèce jusqu'à la rendre axène. C'est un support qui rend facile le dépistage précoce des contaminants, et permet d'évaluer la santé d'une variété avant qu'elle soit propagée davantage. C'est une étape primordiale pour s'assurer de la pureté des toutes les cultures qui en découleront. On l'utilise aussi pour [[fr:Gelose:Culture de spores|isoler de nouveaux cultivars à partir de spores]]. La gélose est un mélange de nutriments et d'agar-agar, un gélifiant végétal d'apparence semblable à la gélatine. La culture sur gélose permet de purifier une espèce jusqu'à la rendre axène. C'est un support qui rend facile le dépistage précoce des contaminants, et permet d'évaluer la santé d'une variété avant qu'elle soit propagée davantage. C'est une étape primordiale pour s'assurer de la pureté des toutes les cultures qui en découleront. On l'utilise aussi pour [[fr:Gelose:Culture de spores|isoler de nouveaux cultivars à partir de spores]].
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 L'agar-agar sert de support au mycélium, les autres ingrédients sont des nutriments. L'ajout de substrat final sert à familiariser le mycélium avec cette nourriture. Le moment venu, ce premier contact lui permettra de préparer plus rapidement les enzymes digestives nécessaires. Il existe plusieurs recettes pour préparer la gélose, en voici une simple et efficace:[(:ref:stamets_ggm)] L'agar-agar sert de support au mycélium, les autres ingrédients sont des nutriments. L'ajout de substrat final sert à familiariser le mycélium avec cette nourriture. Le moment venu, ce premier contact lui permettra de préparer plus rapidement les enzymes digestives nécessaires. Il existe plusieurs recettes pour préparer la gélose, en voici une simple et efficace:[(:ref:stamets_ggm)]
  
-[Pour <del><wrap em>37.5</wrap></del> ml, 1 boîte de Petri]; <WRAP box 300px right download>Pour formuler efficacement vos préparations, consultez le {{:fr:annexes:calculateur_recettes|calculateur de recettes}}.</WRAP>+[Pour <del><wrap em>37.5</wrap></del> ml, 1 boîte de Petri]; <WRAP box 300px right download>Pour formuler efficacement vos préparations, consultez le [[:fr:annexes:calculateur_recettes|calculateur de recettes]].</WRAP>
   * 37 ml eau   * 37 ml eau
   * 0.7g agar-agar   * 0.7g agar-agar
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 ====== Stérilisation ====== ====== Stérilisation ======
 L'erlenmeyer de gélose, les boîtes et/ou les éprouvettes sont donc finalement placés dans l'autoclave, puis recouverts d'une serviette. L'ensemble est stérilisé à 15 psi durant 45 minutes. Une fois la pression retombée, l'autoclave est ouvert, et le contenant interne est apporté devant la hotte à flux laminaire. La serviette peut être retirée à ce moment. Les supports à éprouvettes sont surélevés d'un côté afin que la gélose fige dans un angle de 20º. Pour les boîtes, on procède immédiatement au [[fr:gelose:transvasement]]. L'erlenmeyer de gélose, les boîtes et/ou les éprouvettes sont donc finalement placés dans l'autoclave, puis recouverts d'une serviette. L'ensemble est stérilisé à 15 psi durant 45 minutes. Une fois la pression retombée, l'autoclave est ouvert, et le contenant interne est apporté devant la hotte à flux laminaire. La serviette peut être retirée à ce moment. Les supports à éprouvettes sont surélevés d'un côté afin que la gélose fige dans un angle de 20º. Pour les boîtes, on procède immédiatement au [[fr:gelose:transvasement]].
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 +====== Recyclage de la gélose ======
 +L'agar-agar de qualité est dispendieux. Il semble servir uniquement de support, car le mycélium ne s'y développe qu'en surface, à partir des nutriments ajoutés. Pour la recycler, il suffit de placer le contenu des boîtes de Petri usagées sur du papier-parchemin, puis au déshydrateur. On peut alors conserver la gélose sèche à température pièce, dans une pot hermétique. Elle sera ensuite réduite en poudre et réutilisée. Il faudra éventuellement la supplémenter de nutriments, mais [[fr:annexes:experiences:determiner_la_quantite_de_sucres_residuels_dans_la_gelose_usagee|les quantités sont à déterminées.]]
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 +{{:fr:gelose:dscf2013.jpg?100|}}
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 +La déshydratation est le moyen privilégié, car la congélation semble causer l'éclatement des cellules, réduisant ainsi la fermeté de la gélose. Cet inconvénient pourrait probablement être corrigé en ajoutant un peu d'agar-agar neuf.
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 +Il n'est pas nécessaire de retirer le mycélium, mais ne **recyclez que la gélose saine, non contaminée!**
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 +====== Nettoyage des éprouvettes ======
 +Dans une casserole d'eau, placez les éprouvettes dans un support, sans couvercles, goulots vers le haut et couvercles lâchement serrés. Réchauffez l'eau jusqu'à liquéfaction de la gélose, puis procédé tel qu'indiqué ci-haut. Alternativement, vous pouvez les réchauffer dans un autoclave.